一、常温包埋步骤

粉末样品和薄膜样品不能直接进行超薄切片，必须先由环氧树脂进行包埋固化。

粉末样品包埋操作如下：先在离心管加点粉末，然后再加环氧树脂包埋剂，用牙签将包埋剂和粉末搅拌均匀，在75℃下进行聚合过  夜。

薄膜样品包埋操作如下：先将薄膜样品剪裁至合适大小，然后把样品放进离心管底部，加包埋剂，在75℃下进行聚合过夜。

二、 常温超薄切片步骤

1. 包埋块的修整

进行超薄切片前应先将包埋块修成便于切片的一定大小的形状。修整后的顶端一般为0.5X0.5mm²左右，只要利于切片，根据材料可适当增大或减少顶面面积。

2. 常温超薄切片

先用玻璃刀将样品包埋块顶端修平，换钻石刀操作。钻石刀水槽内注入的是双蒸水。切出的切片漂浮在水面上，再用镊子夹着铜网将切片捞起。  

三、冷冻切片

玻璃化温度低于40℃或者含有弹性体比较软的样品需要冷冻切片。最终根据电镜效果来决定切片方式。

切片步骤：先在室温对样品进行粗修，然后将样品放进提前设置好温度的冷冻超薄切片机中修块切片，不同样品的切片温度不同、切片厚度和切片大小各有不同。切出的切片在刀口上，再用镊子夹着沾了酒精的铜网或者用沾了饱和浓度蔗糖的捞样环将切片捞起，再靠到铜网上。

四、染色

含有双键苯环的用OsO4；晶区，非晶区用 RuO₄ （一般有机物都是晶区和非晶区的结合体）。含N的也可用OsO4，因为N活泼（OsO4是化学反应，比较稳定；RuO₄是渗透染色，不稳定）

粉末样品30mg左右，块体大概1cm长×0.5cm宽×0.3cm高