基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪(MALDI-TOF/TOF)-仪器详情

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1,一般分子量越小测试的越准确,分子量超一万,误差比较大,仪器理论可以测到200000;

2,样品尽量不要含有盐;

3,如果是液体样品,需要备注液体样品的具体浓度(一般要求不低于1mg/mL),以及缓冲液的成分(一般建议Tris,碳酸氢铵,浓度在20mM以下);

4,样品量:粉末样品10mg即可; 液体样品2mL;

5,如果对测试的模式(反射模式,线性模式),默认为线性模式,特殊请自行备注;

6,如果对基质有要求,请自行备注,常用的测试基质为:CHCA,DHB,SA


基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪(MALDI-TOF/TOF)

型号:Bruker ultraflextreme MALDI-TOF/TOF、AB 5800等

测试项目:

MALDI-TOF是近年来发展起来的一种软电离新型有机质谱,依据样品的质荷比(m/z)的不同来进行检测,并测得样品分子的分子量,一般分子量在一万以内测的比较精确,超过之后会有较大误差,仪器理论可以测到200000。

样品种类一般为:蛋白质、核酸、多肽、大分子等。依据测试结果分为:低分辨和高分辨,低分辨精确到小数点后1位,高分辨精确到小数点后4位。

测试模式分为:线性模式和反射模式,默认为线性模式,如果需要反射模式请备注。模式下面又分为:正离子和负离子模式,分子结构不同,有的更容易带正电,有的更容易带负电,正离子看的是带正电的离子,负离子看带负电的。常规都是正离子模式的。

常用的测试基质为:CHCA,DHB,SA,默认为CHCA,特殊测试要求请咨询客户经理。


样品要求:

 样品状态:可为粉末、液体样品,样品尽量不要含有盐。

 粉末样品:细细的粉末5-10mg,在合适的溶剂中溶解性可以或者分散,常用溶剂为CDCl3甲苯、丙酮、甲醇、乙腈、三氟乙酸、水、乙酸乙酯、乙醚、THF

 液体样品:2mL,需要备注液体样品的具体浓度(一般要求不低于1mg/mL),以及缓冲液的成分(一般建议Tris,碳酸氢铵,浓度在20mM以下属于盐类,易电离,多的话干扰结果)


常见问题及回答:
结果展示:

结果展示:

测试结果给出的是T2D格式或者word/pdf+txt测试结果。T2D格式文件可以用Data Explorer V4.5分析软件打开,origin软件作图

image.png

常见问题:

1、测试时正负离子模式需要如何确认?

需要查文献确认一下,分子结构不同,有的更容易带正电,有的更容易带负电,正离子看的是带正电的离子,负离子看带负电的。如果确实不知道那个模式测试,建议先正离子模式测一下,但是要求两个模式都测试一下的,算两个样品收费。

2.样品不纯可以测么?

 需要确认下目标产物和杂质那个更易电离,如果产物易电离,杂质不电离,没影响的,反之就不行了.

3. 测试结果中为什么没有峰?

    可能的原因:没有目标产物、样品浓度太低,样品不离子化,基质不合适

4.选择基质的一般建议:

     先建议查下文献,确认下自己的条件,一般是蛋白类样品建议SA ,1万以下的建议DHB或者CHCA,常规DHB或者CHCA适用于80%的样品。常规:SA—常用于蛋白大分子,DHB— 常用于肽段及小分子,CHCA—常用于肽段及部分小分子。

5.Data Explorer V4.5分析软件下载、安装和打开数据

软件下载:百度云链接: https://pan.baidu.com/s/1QS8bCVAMkJhCfgF_ihYuOA 提取码: yt2y

安装:先安装SETUP 然后重启计算机 再安装SETUP 然后再重启计算机 

打开数据:如下图所示,点下红色中框按钮,数据直接粘到Excel或者Oringin作图,也可选取某段数据直接截图

image.png 

6.常用的基质:https://wenku.baidu.com/view/23c8a92db8f67c1cfad6b8ec.html


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