蛋白印迹实验(Western blot)
1. 预约前需要您确认的信息:
(1)明确样品中是否存在检测的目的蛋白?并且在哪个时期存在?是否需要外源性刺激其表达?(这些问题决定了前处理的方法和时间)
(2)目的蛋白的是否容易出现降解?分子量大小?是否存在于细胞或组织特定部位需要特殊方法提取?(这些问题涉及目的蛋白提取方案及是否可以寄送)
(3)目的蛋白含量是否达到wb的检测限?(目前认为Western Blot的有效检测下限为0.1-1ng,含量高有助于条带显影)。
2. 送样要求:
送样要求等更多项目信息可点击右侧边栏的“查看项目详情”进行查看。
上图为通过Western blot检测细胞内蛋白的表达情况
送样须知
实验前需要确认些什么?
1.明确样品中是否存在检测的目的蛋白?并且在哪个时期存在?是否需要外源性刺激其表达?(这些问题决定了前处理的方法和时间)
2.目的蛋白的是否容易出现降解?分子量大小?是否存在于细胞或组织特定部位需要特殊方法提取?(这些问题涉及目的蛋白提取方案及是否可以寄送)
3.目的蛋白含量是否达到wb的检测限?(目前认为Western Blot的有效检测下限为0.1-1ng,含量高有助于条带显影)
如何确认目的蛋白的抗体?
1.明确目的蛋白名称或者目的基因名称、明确样品种属来源;
2.在各个抗体或试剂公司网站进行搜索;
3.选择抗体的反应性(样品是什么种属来源就选择什么物种);
4.选择抗体适合的用途(如果抗体需要既用于wb又用于后续做免疫组化等实验,要选择都适用的抗体)。
需要提供
1. 待测样品(材料或者样品处理后的细胞/蛋白,也可由我们代处理)。
2. 提供待测样品的一抗及其说明书(一抗一般为5ul,也可由平台代购)。
3. 其他所涉及的细胞、试剂盒以及生物耗材等平台都可以有偿提供。
服务周期:
具体按照实验要求,一般为接受样品后2-3周,具体实验周期请预约前与指南针工作人员沟通确认,谢谢!
交付内容:
实验报告、内参蛋白和目的蛋白曝光胶片各一张。
1·提交需求
2·沟通细节
3·付款确认
4·下载结果